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表面活性剂是洗手液的主要原材料之一，其主要功能是去除手上的油污和污垢，并要求对皮肤，在环境中可以自然降解，降解后的产物对环境无害。
主要采用阴离子表面活性剂以及少量的非离子和两性离子表面活性剂。 阴离子表面活性剂有十二烷基硫酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸盐、月桂酰肌氨酸盐等。
非离子表面活性剂一般较少在洗手液中使用，少量的加入可以增进去污作用和提高泡沫的稳定性，如椰油酸二乙醇酰胺，其中烷基糖苷的加入可以降低表面活性剂的对皮肤。少量的两性离子加入有利于发泡和泡沫的持久，如甜菜碱和十二烷基二甲基氧化胺。